|
|
ГЕПАТИТ "А"
  |   |
|
ГЕПАТИТ "В"
  |   |
|
ГЕПАТИТ "С"
  |   |
|
ГЕПАТИТ "E"
  |   |
|
ГЕПАТИТ "G"
  |   |
|
АЛКОГОЛЬНЫЙ ГЕПАТИТ
  |   |
|
ТЕРАПИЯ ГАПАТИТА
  |   |
|
ФТОГАЛЛЕРЕЯ ГЕПАТИТА
  |   |
|
СТАТЬЯ ПО ТЕМЕ
  |   |
|
СЛОВАРИК
  |   |
ВИРУС ГЕПАТИТА D BГD (Hepatitis Delta virus)
возбудитель гепатита D (Дельта гепатита ). BГD не принадлежит ни к одному из известных
семейств вирусов животных. По своим свойствам BГD наиболее близок к вироидам и сателлитньм вирусам растений. В 1977 г.
итальянский исследователь М. Риссетто при помощи метода флюоресцирующих антител обнаружил в
гепатоцитах
больных хроническим гепатитом
В антиген, отличный от антигенов вируса гепатита В . Выявленный антиген был назван дельта-антигеном.
Эксперименты по заражению шимпанзе материалом, содержащим дельта-антиген, продемонстрировали, что он является частью
трансмиссивного агента (дельта-агента или BГD), вызывающего гепатит, отличный от других вирусных гепатитов.
BГD — сферическая частица со средним диаметром 36 нм (с колебаниями от 28 до 39 нм), состоящая из ядра (HDAg)
и внешней оболочки, образованной поверхностным антигеном вируса В . Плавучая плотность в градиенте CsCI — 1,25 /см3 .
Морфологически частицы BГD, циркулирующие в крови больных дельта-гепатитом или носителей BГD, сходны с
частицами Дейна,
но с менее четко очерченным ядерным антигеном.
Геном BГD представлен однонитевой, циклической молекулой РНК, состоящей приблизительно из 1700 нуклеотидов. В BГD,
циркулирующем в крови больных острой или хронической дельта-инфекцией, РНК BГD образует палочковидную неразветвленную
структуру. Характер плотной упаковки генома определяется высокой степенью комплиментарности нуклеотидов, входящих в
его состав. Причем, сочетание пар оснований гуанин-цитозин, составляет до 60%. Анализ нуклеотидных последовательностей
РНК BГD нескольких изолятов вируса выявил их частичную гетерогенность (от 72,1% до 92,0% гомологии). В геноме BГD
имеется несколько открытых рамок считывания, как на геномных, так и на антигеномных нитях РНК. Причем, в отличие от
вироидов и сателлитных вирусов растений в РНК закодирован вирусспецифический полипептид - HDAg (пятая открытая рамка
считывания, локализованная на комплементарной зоне РНК BГD).
Выявлено две разновидности HDAg с молекулярными массами в 24 и 27 кД. На их поверхности расположен общий эпитоп,
определяемый при помощи моноклональных антител человеческого происхождения. Считается, что малая форма HDAg необходима
для репликации BГD, а большая для постройки вирусной частицы. Дельта-антиген локализуется в ядрах инфицированных
гепатоцитов, в ядрышках и/или нуклеоплазме.
HDAg имеет выраженную РНК-связывающую активность. Связывание происходит благодаря узнаванию антигеномной уникальной
вторичной структуры РНК BГD, что определяет строгую специфичность связывания и объясняет отсутствие взаимодействия
с другими вирусными и клеточными РНК. При нагревании BГD происходит укрепление связи HDAg с РНК, которая становится
устойчивой к действию мочевины, гуанидина или меркаптоэтанола. Дельта-антиген устойчив к нагреванию, действию кислот
и нуклеаз, но разрушается в присутствии щелочей и протеаз. Он обладает антигенной активностью и может быть использован
для конструирования диагностических препаратов.
Механизм прикрепления, проникновения и раздевания BГD в клетках мало изучен. Вместе с тем считается, что
HBsAg,,
покрывающий дельта-антиген, кодированный S-геном вируса гепатита В (включая pre-SI, pre-S2 и S-зону),необходим для прикрепления BГD к
поверхности гепатоцита. При этом в отличие от частиц Дейна, в которых HBsAg представлен частицами с pre-Sl, pre-S2
и S-пептидами в соотношении 1:1:4, в дельта-вирусе это соотношение составляет 1:5:95.
Инфицированные гепатоциты содержат как геномные (+), так и антигеномные (-) молекулы РНК BГD в соотношении 5-30:1. РНК
BГD представлена линейными и циклическими формами. Общее количество молекул РНК BГD может достигать 100000-300000 копий в
одной клетке.
Репликация РНК BГD происходит в ядре зараженного гепатоцита; по аналогии с вироидами она может быть описана следующим
образом: на кольцевой молекуле геномной РНК (+) при помощи клеточного фермента (возможно ДНК-зависимой РНК-полимеразы II)
синтезируется комплиментарная (-) цепь РНК. Синтез нуклеиновой кислоты осуществляется согласно модели раскручивающегося
кольца с вытеснением 5' конца РНК с последующим синтезом плюс-цепи. Возможно, антигеномные нити РНК сворачиваются в
кольцо с последующим синтезом геномных РНК BГD. Расщепление линейных олигомерных структур РНК осуществляется при помощи
клеточных ферментов. Процесс РНК РНК копирования может происходить по симметричному и асимметричному пути.
Вопросы, связанные с транскрипцией и трансляцией гена, кодирующего HDAg, до сих пор полностью не решены. Имеется скудная
информация и о таких этапах морфогенеза, как сборка и выход вируса из гепатоцита.
Вирус гепатита D не может участвовать в развитии гепатитной инфекции без одновременной
репликации вируса
гепатита В. Этот факт определяет две возможные формы их http://infekto1.narod.ru/VGA/Koinficirovanie.txt
взаимодействия:
одновременного инфицирования ВГВ и BГD коинфекция
инфицирования ВГD носителя вируса гепатита В —
суперинфекция.
Характер взаимосвязи этих вирусов определяется не только использованием HBsAg для формирования внешней оболочки BГD, но
и другими, до конца непонятными взаимодействиями. Так, BГD ингибирует репликацию ВГВ, приводя к уменьшению экспрессии
HBcAg и HBsAg и угнетению активности ДНК-полимеразной активности в течение острой инфекции. Одним из возможных объяснений
этого факта являются данные о стимуляции дельта-вирусом внутриклеточного синтеза
интерферона , который вызывает ингибицию репликации ВГВ.
Последнее время получены экспериментальные данные, что дельта-вирус может размножаться в организме приматов и без участия
вируса гепатита В, но при этом никаких повреждений не наблюдается. Предположительно наружная оболочка дельта-вируса
формируется из клеточных белков, вследствие чего его обнаружение затруднено.
Анализ инфекционной активности дельта-вируса показал, что она приблизительно на пять порядков ниже по сравнению с ВГВ.
Инфицирование дельта-вирусом может вызвать острое заболевание, заканчивающееся выздоровлением или формированием
хронического носительства BГD. Экспериментальное заражение дельта-вирусом человекообразных обезьян-носителей HBsAg и
сурков-носителей вируса гепатита сурков вызывает острую суперинфекцию. При этом через 2 недели после заражения в
гепатоцитах животных удается идентифицировать дельта-антиген, который по своим физико-химическим и иммуногенным свойствам
идентичен дельта-антигену из гепатоцитов больного человека. Полученный при экспериментальной дельта-вирусной инфекции у
сурков дельта-антиген с успехом используется для приготовления коммерческих диагностических препаратов, применяющихся для
выявления серологических маркеров дельта-инфекции у людей. Дельта-вирусную инфекцию удалось также воспроизвести и при заражении дельта-вирусом пекинских уток-носителей вируса
гепатита пекинских уток.
Дельта-вирус может быть обнаружен в гепатоцитах и в крови больных острой и хронической дельта-инфекцией. Применение
иммуноэлектронной микроскопии, при которой используются антитела к HBsAg, позволяет изучать морфологию дельта-вируса.
Маркерами,
свидетельствующими о наличии дельта-вируса в исследуемом материале, служат дельта-антиген и/или PHK BГD.
Для обнаружения дельта-антигена в биопсийном или аутопсийном материале применяют метод флюоресцирующих антител и
иммунопероксидазные методы, когда комплекс дельта-антигена и антител к нему, меченных пероксидазой хрена, визуализируют
при помощи гистохимической реакции на пероксидазу.
В сыворотке крови дельта-антиген определяют при помощи
иммуноферментного или
радиоиммунного
анализа лишь только после того, как исследуемый материал обрабатывается неионными детергентами (твин, тритон и др. ), разрушающими наружную оболочку
вируса, тем самым делая доступными антигенные детерминанты HDAg.
Детекцию РНК BГD проводят при помощи
кДНК-гибридизации
с зондами, полученными генноинженерным путем, или же методом
амплификации кДНК ВГD , позволяющим выявлять до 103 молекул РНК BГD.
Культивирование BГD в клеточных линиях, в том числе печеночного происхождения с интегрированным геномом ВГВ, до сих пор
были неудачны. Вместе с тем, описаны эксперименты по продукции BГD в линии клеток гепатомы человека (HUH-7) и почек
мартышек (COS7) после их трансфекции РНК ВГD.
НАПИСАТЬ
|
|
|