ДНК-гибридизация * DNA hybridisation 

 - метод выборочного связывания определенных сегментов oднонитчатой ДНК или РНК с комплементарными им последовательностями
 в однонитчатой ДНК, которая находится на нитроцеллюлозном фильтре . ДНК-г. используется для того, чтобы: а) определить
 степень идентичности последовательностей в ДНК организмов разных видов; б) выделить молекулы в гетерогенной популяции 
ДНК или РНК, комплементарные ДНК с известной экспериментатору последовательностью нуклеотидов. 


Нитроцеллюлозный фильтр * nitrocellulose filter - – нитроцеллюлозные нити в форме мембраны с порами определенного размера
 (0,45 mм). Селективно (выборочно) улавливают двунитчатую ДНК или ДНК-РНК-гибриды и свободно пропускают однонитчатые 
молекулы. Однонитчатые ДНК и РНК также могут задерживаться Н.ф., если его проинкубировать при 80°С в течение 2 ч (спекание).
 Такие блоты (фильтры) используются в Нозерн- и Саузерн-блот экспериментах. 
 

	кДНК - ГИБРИДИЗАЦИЯ (cDNA hybridization) 

- метод обнаружения нуклеиновых кислот с помощью гибридизационных зондов. Химической основой метода является соединение 
искомой нуклеиновой кислоты с меченым зондом через комплементарные ДНК-ДНК участки; исход их взаимодействия учитывается 
по появлению метки (обычно радиоизотопной) в составе образовавшегося комплекса. Постановка кДНК - гибридизации предполагает:
 


экстракцию и денатурирование нуклеиновой кислоты; 


инкубацию ее в растворе с избытком молекул зонда в режимах, специально подобранных для каждой конкретной гибридизации 
(в конечном счете они определяются степенью комплементарности реагирующих участков); 


отмывание комплекса от несвязавшихся молекул зонда; и 


учет результатов по интенсивности сигнала, поступающего от метки в составе комплекса. Чаще всего применяют т. н. точечную 
(dot-blot) гибридизацию на мембранных фильтрах.

В работе с вирусами гепатитов кДНК-гибридизация позволяет обнаруживать частицы, содержащие полномерную нуклеиновую кислоту 
или ее фрагменты с последовательностями, комплементарными имеющимся зондам. Чувствительность ее, как правило, на 1—2 порядка 
выше, чем у твердофазных серологических тестов. В качестве примера можно указать на успешное применение данного метода для
 обнаружения частиц Дейна в крови и биоптатах печени при подозрении на инфекцию гепатита В  или поиск вируса гепатита А 
 в экскретах больного и объектах внешней среды. кДНК — гибридизация является одним из основных методов в работах по генной 
инженерии . С ее помощью, в частности, осуществляется отбор клонов микроорганизмов, несущих встроенные нуклеотидные 
последовательности.