метод RT-PCR. Механизм простой полимеразной реакции не пригоден для идентификации рибонуклеиновых кислот, так как Taq-полимераза не способна катализировать синтез ДНК на матрице РНК. Вместе с тем хорошо известно, что геномы многих вирусов состоят из молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК) и, вследствие этого, идентификация РНК вирусов, таких как вирус гепатита С, представляется актуальной задачей. Практически это решается с помощью нескольких приемов. 1. Использование дополнительного фермента - РНК-зависимой ДНК полимеразы- обратной транскриптазы ОТ (RТ - reverse transcriptase). Реакция, катализируемая этим ферментом, приводит к образованию однонитевых фрагментов ДНК, используемых в дальнейшем в амплификации с помощью Taq-полимеразы. 2. Как уже было отмечено выше, Taq-полимераза не способна катализировать процесс обратной траскрипции, то есть синтез однонитевой ДНК на РНК-матрице. Вместе с тем, в 1991 г. Маерсом и Гельфандом был охарактеризован фермент ДНК-зависимая ДНК-полимераза, выделенная из другого экстремального термофила Thermus thermophilus (Tth-полимераза), которая в присутствии ионов марганца катализировала синтез на РНК однонитевой комплементарной ДНК. Последующее добавление в среду ионов магния и хелаторов ионов марганца позволяло ферменту катализировать обычную ДНК-зависимую ДНК-полимеразную реакцию, то есть этот фермент мог быть использован для одновременного синтеза комплементарных однонитевых фрагментов ДНК и для амплификации ДНК.